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微流控單細胞包封系統
點擊次數：761 更新時間：2022-12-07
 

微液滴的單細胞包封是采用微流控系統生成微液滴進行單細胞包封的技術，采用壓力控制器驅動的微流控裝置可生產皮升級大小的液滴，可在單細胞水平上進行Hela等細胞的包封及進一步的分析。Elveflow 提供微流控單液滴包封的全套儀器設備及相關的用戶指導手冊，用于微液滴的單細胞包封及單細胞測序。

微流控單細胞包封的應用包括:

腫瘤學（洞察小細胞亞群攜帶的突變）

免疫學（區分不同的免疫細胞群或表征免疫細胞群）

神經學（獲取詳細的單細胞圖譜，以了解和識別大腦中不同類型的神經元及其連接分子）

發育生物學（逐個細胞繪制胚胎的整個發育過程）

單細胞組學（揭示組織樣本的細胞異質性）

Elveflow 采用微液滴進行單細胞包封的儀器配置如下：

  1. OB1 壓力控制器，至少有兩個      0–2000 mbar 通道

  2. 1 xMFS2 流量傳感器，0.4–7 μL/min，用于油相溶液

  3. 1 Xmfs3 流量傳感器      4.2–80 μL/min，用于細胞懸液

  4. 1 x 套件魯爾鎖啟動連接件

  5. 2 x 15 mL 儲液管

  6. 具有疏水通道的微流控芯片

  7. 用于觀察的顯微鏡

  8. 用于成像的攝像頭（可選）

  9. HF5-7500 +      1 % FluoSurf表面活性劑

  10. Aquapel用于疏水處理（可選）

微流控芯片是微液滴單細胞包封的關鍵部件，可采用流動聚焦的微流控微液滴生成芯片，材質是PDMS ，微通道可以用Aquapel進行處理，形成疏水性的微流體通道。

Fluidic 947 微液滴生成芯片，可獲得10-30μm的液滴。

Fludic 440 微液滴生成芯片，可獲得50-80μm的液滴

單細胞包封微流控芯片，生成20-50 μm的液滴。

這些芯片有2個入口，1個出口，入口分別是細胞懸浮液和油相，可實現單細胞包封。

如果想進行單細胞包封后測序，可采用4個入口和1個出口的微流控芯片，4個入口分別用于細胞懸浮液，Barcoded 水凝膠珠，裂解緩沖液和油相。

例如采用細胞溶液,13.57X105細胞/ml, 生微液滴平均直徑為51.2μm（CV=2.4%）。

參考文獻：Collins. D et al (2015), “The Poisson distribution and beyond: methods for microfluidic droplet production and single cell encapsulation". Lab on a Chip, 15, 3439-3459. 
 
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